Quy trình chuẩn cho phản ứng pcr

Quy trình pcr tiêu chuẩn được chia thành ba bước:

Biến tính DNA: (90 ℃ -96 ℃): Mẫu DNA Sợi đôi trải qua quá trình phân tách liên kết Hydro dưới tác động nhiệt, tạo thành DNA sợi đơn

Ủ: (60 ℃ -65 ℃): khi nhiệt độ hệ thống giảm, mồi liên kết với mẫu DNA, tạo thành một sợi kép cục bộ.

Độ mở rộng: (70 ℃ -75 ℃): dưới tác dụng của Enzyme taq (ở KHOẢNG 72 ℃, với hoạt động tốt nhất), dntp được sử dụng làm nguyên liệu ban đầu, kéo dài từ đầu 3 'của mồi theo hướng 5 '→ 3', để tổng hợp các sợi DNA bổ sung cho mẫu.

Sau mỗi chu kỳ biến tính, ủ và mở rộng, hàm lượng DNA tăng gấp đôi. Ngày nay, một số pcr có thể tái tạo trong một thời gian ngắn ngay cả khi hoạt động của Enzyme taq không tối ưu do vùng khuếch đại ngắn. Do đó, có thể sử dụng phương pháp hai bước, bao gồm ủ và kéo dài đồng thời trong khoảng từ 60oC đến 65oC, để giảm một quá trình tăng và giảm nhiệt độ và cải thiện tốc độ phản ứng.

Prev: Mẹo Pipet lọc để làm gì?

Tiếp theo: Mẹo Pipet tự động hóa cho Máy Trạm Hamilton